Зачем нужно иммерсионное масло?

31 марта 2014

В оптических микроскопах могут использоваться сухие и иммерсионные объективы. Но, если с сухим объективом все более или менее понятно, то о применении иммерсионного объектива, нужно сказать отдельно.
   
Иммерсионным объективом, называют такой объектив, на который для увеличения резкости и повышения яркости исследуемого объекта, а также для расширения пределов изображения, наносят специальное масло. Иммерсионное масло находится в пространстве между первой линзой (конденсором) и предметным стеклом.
   
Почему улучшается качество изображения объекта? Потому что преломление лучей в воздухе ниже, чем при их прохождении через жидкие среды. Кроме того, не происходит рассеивание лучей, а значит, удается повысить контраст отдельных частей исследуемого объекта и глубину просмотра.
   
В качестве масла для иммерсии используются различные вещества. Почти все они имеют маслянистые свойства, например, первой жидкостью для таких объективов было кедровое масло, затем стали использовать синтетические масла и глицерин, добавленный в воду. Существует также методика работы с водными иммерсионными объективами. В настоящий момент производители микроскопов рекомендуют использовать только те иммерсионные жидкости, которые прилагаются к конкретному изделию. Замена одного масла на другое может привести к ухудшению качества изображения, появлению бликов и сферических аберраций, неравномерности освещения исследуемого объекта.
   
Масляные и водные иммерсионные объективы применяются при исследовании объектов через световой микроскоп, а водно-глицериновая иммерсия нужна в том случае, когда изучаемый объект сильно поглощает ультрафиолетовый свет.
   
Какова должна быть последовательность действий при нанесении иммерсии?
Если работать с масляной иммерсией, то вначале на исследуемый образец капают монтирующую жидкость, накрывают препарат покровным стеклом. И только после этого, на покровное стекло наносят иммерсионное масло. Кстати, у объективов, предназначенных для работы с масляной иммерсией, стоит маркировка – черная полоска возле фронтальной оправы и надпись «МИ» или «Oil».
   
Для работы с водной иммерсией на исследуемый препарат наносят каплю фосфатного буферного раствора, а саму микроскопию производят с объективом для водной иммерсии (он имеет белую полосу возле фронтального компонента и буквенную маркировку «ВИ» или «W»).
   
Несколько слов о том, какие виды иммерсионного масла существуют.
Производители выпускают иммерсионное масло А (классическое) и Б (профессиональное). Разница между нм состоит в том, что первый вид масла используется во время работы с апохроматическими и ахроматическими объективами, однако оно не используется в работе с люминесцентными объективами. Кроме того, масло типа А не комплектуется системой визуализации изображения. Масло типа Б, напротив, укомплектовано системой визуализации, и предназначается, в первую очередь, для работы в условиях искусственного освещения. Этот вид масла менее вязкий и обеспечивает большее пропускание светового потока.
   
По окончании работы с иммерсией, объектив необходимо обязательно очистить мягкой салфеткой или ватой, смоченной в этиловом ли изопропиловом спирте. Нельзя допускать нагревания масла выше 25°С, а также его замерзания. Оптимальная рабочая температура составляет от 20 до 24°С. По окончании срока годности масло использовать не рекомендуется.

все статьи